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实时荧光定量-PCR法检测6种肺癌细胞系中吉西他滨耐药相关基因的表达
         
Detection of gemcitabine-resistant genes expression in six lung cancer celllines using real-time fluorogentic quant-itative PCR

摘    要
目的: 研究6株肺癌细胞系中吉西他滨耐药相关基因的表达及吉西他滨的细胞毒作用,探讨对吉西他滨的耐药机制.方法: 提取人肺腺癌细胞GLC-82,NCI-H 460和A 549,人低转移和高转移的肺大细胞癌细胞95-C和95-D以及人鳞状上皮癌细胞QG 56等6株肺细胞系的总RNA,反转录为cDNA,以β-actin作内对照,采用RFQ-PCR(real-time fluorogentic quantitative,PCR)检测RRM 1,PTEN,ERCC 1,dCK,CDA这5种基因在这些细胞中的表达情况,并用MTT法检测吉西他滨对各株细胞系的IC50值.结果: 在6株肺癌细胞中肺鳞癌QG 56细胞RRM1,PTEN,ERCC1 mRNA的表达最高,dCK和CDA mRNA的表达在各株细胞中的差异无统计学意义,吉西他滨对QG56细胞的IC50值最高.结论: RFQ-PCR方法可以应用于肿瘤细胞基因的检测;RRM1与PTEN,ERCC1 mRNA的表达有相关性,RRM1 mRNA的高表达与吉西他滨耐药相关.
标    签 癌,非小细胞肺   抗药性,肿瘤   基因表达   Carcinoma, non-small celllung   Drug resistance, neoplasm   Gene expression  
 
Abstract
Objective: To quantify the expression of gemcitab ine-resistant genes in six lung cancer cell lines, study the cytotox iceffects of gemc itabine, and reveal themechanism for the resistance of lung cancer cells to gemcitabine. Methods: The total RNA wasex tracted from human lung adenoma cells (GLC-82, NC I-H460, and A549), human giant cell lung cancer 95-C (low metasta tic), 95-D(high me tastatic) and human squamous lung cancer cells (QG56). Then the cDNA was amp lified by real-tmie fluorogentic quantitative PCR. Bactin was used as an internal control Expression of ribonucleotide reduc taseM 1 (RRM 1), phospha tase and tensin homo loguedeleted on chromosome 10 (PTEN), exc ision repair cross-complemen tation 1 (ERCC-1), dCK, and CDA was detected by RFQ-PCR.Cyto toxicity was measured with MTT assay and IC50 was calculated. Results: The expression of RRM 1, PTEN, and ERCC1 were all theh ighest in QG56 cell line in the six cell lines. The expressions of dCK and CDA mRNA had no significant difference among the six celllines. IC50 of gemcitabine was the highest for QG56 cells. Conclusion: RFQ-PCR could be used formonito ring the gene expression intumor cell lines. The mRNA expression of RRM 1 corre lated with the expression of PTEN/ERCC1.

中图分类号 R733.7   DOI 10.3781/.jissn.1000-7431.2008.03.012

 
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所属栏目 基础研究

基金项目 首都医学发展基金资助项目(编号:2003028)

收稿日期 2007/7/8

修改稿日期 2007/10/11

网络出版日期

作者单位点击查看


备注林莉(1972-),女(汉族),博士,主治医师

引用该论文: LIN Li,LIU Xiao-Qing,WANG Wei-xia,WANG Sheng-Qi,SONG San-Tai. Detection of gemcitabine-resistant genes expression in six lung cancer celllines using real-time fluorogentic quant-itative PCR[J]. Tumor, 2008, 28(3): 228~231
林莉,刘晓晴,王伟霞,王升启,宋三泰. 实时荧光定量-PCR法检测6种肺癌细胞系中吉西他滨耐药相关基因的表达[J]. 肿瘤, 2008, 28(3): 228~231


被引情况:


【1】姚传山,马磊,刘瑞青,李醒亚, "Ⅰ~Ⅲ期肺腺癌组织中EGFR基因突变与ERCC1和RRM1蛋白表达的关系",肿瘤 33, 258-263(2013)



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参考文献
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